Состав набора для культивирования клеток Vero:
- Бессывороточный, химически определенный, без протеинов, пептидов и других добавок
- Не содержит компонентов животного происхождения (ACF)
- Обеспечивает высокую плотность роста и высокую экспрессию вирусов в адгезивных клетках Vero
- Подходит для различных методов культивирования, например, в T-флаконах, клеточных фабриках, роллерных бутылях, колбах с мешалкой и на микроносителях
Информация для заказа набора для культивирования клеток Vero:
| Название | Номер по каталогу | Объем упаковки | Назначение | |
|---|---|---|---|---|
| CD Vero VR1 | LTPM-VR1 | 2L/ 5L/ 10L/ 100L/ 500L/ под заказ | Среда | Заказать |
| Trace element VR1-T (100×) | LTPM-VR1-T | 50mL/ 100mL/ под заказ | Микроэлементы | Заказать |
| CD Vero VR1-F feed (1000×) | LTPM-VR1-F | 50mL/ 100mL/ под заказ | Добавки | Заказать |
| Recombinant Tripsin-EDTA (1×) | LTPM-TR1 | 50mL/ 100mL/ под заказ | Расщепляющий агент | Заказать |
Эксперимент с последовательными пассажами
- Культуральный сосуд: флакон T-75 см2 (T-флакон)
- Плотность посева: 5,0–6,0 × 106 клеток/Т75 (соотношение 1:4)
- Пассаж: каждые 96 ± 12 часов
- При восстановлении адгезивных клеток Vero в среде CD Vero VR1 ростовые свойства клеток могут полностью восстановиться после 2 последовательных пассажей
- При последовательных пассажах плотность клеток стабильна и находится в диапазоне 24–27 × 106 клеток/T75
- Время удвоения при культивировании в Т-флаконах составляет 44–48 ч
В ходе последовательных пассажей состояние клеток оценивают под микроскопом через 24 ч, 48 ч, 72 ч и 96 ч:
- Через 24 ч все клетки прикрепляются к поверхности Т-флакона
- Через 96 ч слой клеток становится практически сплошным
Эксперимент со сферическим микроносителем
- Культуральные сосуды: колба с мешалкой объемом 500 мл → биореактор объемом 3 л → биореактор объемом 15 л
- Тип микроносителя: Cytodex 1 (Цитодекс 1)
- Концентрация микроносителя: 3 г/л
- Плотность посева: 0,3–0,5 × 106 клеток/мл
Для начального размножения клеток используют колбу с мешалкой объемом 500 мл и биореактор объемом 3 л (с переносом клеток с носителя на носитель):
- На 4 день плотность жизнеспособных клеток может достичь 1,98 × 106 клеток/мл
- Стабильный рост клеток в 500 мл колбе с мешалкой и 3 л биореакторе
Эксперимент в производственном биореакторе на 15 л:
- Максимальная плотность жизнеспособных клеток: 2,76 х 106 клеток/мл
- Размножение клеток продолжается в течение 7 дней
- В первый день после посева клетки полностью прикрепляются к поверхности сферического микроносителя
- На 2-й и 3-й день продолжается размножение клеток
- Начиная с 4 дня, клетки постепенно покрывают всю поверхность микроносителя
Эксперимент с инфицированием CDV (Canine distemper virus — вирус чумы собак)
