IHC восстановительные буферы. Буферы для демаскировки эпитопов на рутинных срезах для иммуногистохимии

Для достижения наилучших результатов обнаружения разных эпитопов могут требоваться разные буферные растворы. В целом мы предлагаем 5 разных буферных растворов для демаскировки антигенов, включая универсальный буферный раствор R-Universal, который пригоден для работы с абсолютным большинством коммерческих антител.

Схема выбора буферного раствора для HIER

Данная схема позволяет выбрать правильный буферный раствор для антител и выбрать антитела, требующие одного и того же типа открытия эпитопов. Она также пригодна для многоцветного ИФ (IF)-окрашивания после одного цикла обнаружения эпитопов с использованием одного и того же буферного раствора.

Выбор буферного раствора для HIER

Для демаскировки эпитопа следует использовать разные буферные растворы в зависимости от структуры эпитопа и составляющих его аминокислот. Используйте данную схему для выбора наиболее подходящего буферного раствора.

Буферные растворы для обнаружения эпитопов

R–Universal. Буферный раствор для прибора 2100 Retriever и других систем HIER. Обработка ФФЗП (FFPE)-срезов приводит к уменьшению количества вызванных формалином перекрестных сшивок и изменений белков, удалению отложений ионов металлов и рефолдингу белков. рН 7,4. Пригоден для большинства антител.

T–Universal. Буферный раствор для любой системы HIER. Обработка ФФЗП (FFPE)-срезов приводит к устранению вызываемой нагреванием агрегации белков и удалению отложений ионов металлов. Используется с антителами, в норме требующими обнаруживающего Трис-ЭДТА буфера. Рекомендуется для некоторых прерывистых эпитопов. рН 9,0.

U–Recovery. Специальный буферный раствор для прибора 2100 Retriever для обнаружения линейных эпитопов, расположенных в скрытых (недоступных в нативной молекуле белка) структурах. Используется для обработки ФФЗП (FFPE)-срезов с целью окрашивания антителами, распознающими только восстановленные формы белка при анализе методом вестерн-блот. рН 7,4.

L–Recovery. Буферный раствор для прибора 2100 Retriever и других систем HIER, используемый вместо классического цитратного буфера для улучшения окрашивания по сравнению с классическими буферными растворами этого типа. Включен в линейку для вашего удобства. рН 6,0.

H–Recovery. Буферный раствор для прибора 2100 Retriever и других систем HIER, используемый вместо классического ЭДТА-буфера для улучшения окрашивания по сравнению с классическими буферными растворами этого типа. Включен в линейку для вашего удобства. рН 8,0.

Выбор и комбинирование буферных растворов для HIER

Буферный раствор R-Universal успешно открывает эпитопы для большинства коммерчески доступных антител против рекомбинантных белков или пептидных эпитопов. Однако существует ограниченный ряд антител, требующих обработки ФФЗП-срезов тканей специальным буферным раствором для надлежащего восстановления реакционной способности антигена после фиксации формалином и заливки в парафин. Поскольку прибор 2100 Retriever позволяет за один цикл обрабатывать до 6 индивидуальных камер для стекол, рекомендуем сначала проверить работу антител на срезах, обработанных разными буферными растворами (просто используйте набор буферных растворов для обнаружения эпитопов, #AP0545-S). Это особенно важно, если вы планируете использовать 3 и больше антител для одновременного многоцветного окрашивания (multiplex). Окрашивание и морфологию тканей можно улучшить, если обработать срезы на стекле в буферном растворе, подходящем для всех антигенов, а не последовательно обрабатывать срезы в разных буферных растворах.

Информация для заказа IHC восстановительных буферов (IHC Recovery buffers)