Аналитическая колонка для аффинной хроматографии антител Helios A – колонка для высокоэффективной жидкостной хроматографии.
Колонка предварительно заполнена смолой Helios A на основе полистирола и дивинилбензола со средним размером частиц 20 мкм. Ее устойчивые к действию щелочей лиганды протеина А используются для быстрого измерения и приготовления небольших объемов биопрепаратов, включая моноклональные антитела и химерный белок Fc. Благодаря удобству, эффективности и надежности метода данная хроматографическая колонка широко применяется для скрининга состояния клеточных культур в ходе научно-исследовательских работ, а также для контроля качества при производстве.
Основные области применения аналитической колонки для аффинной хроматографии антител Helios A
- Скрининг состояния культуры: выбор клеточных линий и условий их культивирования путем быстрого определения титра.
- Контроль качества очистки: быстрое определение объема антител или химерного белка Fc во входящем потоке жидкости.
- Определение содержания антител или химерного белка Fc после биотехнологической очистки.
- Приготовление антител в небольших количествах.
Особенности аналитической колонки для аффинной хроматографии антител Helios A
- Высокая степень разрешения, устойчивость к высокому давлению: средний размер частиц 20 мкм, максимальное давление 20 МПа, надежная и стабильная.
- Удобство и быстрота определения: испытание одного образца можно провести за несколько минут.
- Устойчивые к действию щелочей рекомбинантные лиганды: более высокая связывающая способность и более широкая область применение, могут выдерживать безразборную очистку (CIP) 0,1–0,5 М раствором NaOH.
Таблица 1. Технические данные аналитической колонки для аффинной хроматографии антител Helios A.
Материал колонки | Полиэфирэфиркетон (PEEK) |
Матрица на основе смол | Полистирол-дивинилбензол |
Средний размер частиц | 20 мкм |
Функциональная группа | Устойчивый к действию щелочей рекомбинантный протеин А |
Технические характеристики колонки | 2,1 × 30 (внутренний диаметр (ВД) в мм × высота слоя (В) в мм) |
Объем | 0,1 мл |
Максимальная скорость потока | 4 мл/мин |
Максимальное давление | 20 МПа |
Рабочая температура | Рабочая температура: 2~40 °C, не ниже уровня замерзания |
Испытания стандартного образца на аналитической колонке для аффинной хроматографии антител Helios A
Стандартная кривая образца иммуноглобулина G (IgG) человека
Условия проведения эксперимента:
- Колонка: аналитическая колонка Helios A, 2,1 мм (ВД) × 30 мм (В)
- сходное изделие одного из импортных брендов, объем колонки 0,1 мл
- Система: Agilent 1200 HPLC, с УФ-мониторингом: 280 нм
- Уравновешивающий буферный раствор (буфер А): 50 мМ фосфатный буферный раствор + 150 мМ раствор NaCl, с рН 7,0
- Элюирующий буферный раствор (буфер В): 100 мМ раствор уксусной кислоты, с рН 2,5
- Скорость потока: 3 мл/мин
- Образец: IgG человека
- Объем загрузки образца: 20 мкл стандартного образца IgG
- Концентрация: 0,125 мг/мл – 20 мг/мл
Рис. 1. Стандартная кривая образца IgG человека
Стандартная кривая одного биспецифического антитела
Условия проведения эксперимента:
- Колонка: аналитическая колонка Helios A, 2,1 мм (ВД) × 30 мм (В)
- Система: Agilent 1200 HPLC, с УФ-мониторингом: 280 нм
- Уравновешивающий буферный раствор (буфер А): 50 мМ фосфатный буферный раствор + 150 мМ раствор NaCl, с рН 7,0
- Элюирующий буферный раствор (буфер В): 100 мМ фосфатный раствор, с рН 2,5
- Скорость потока: 1 мл/мин
- Образец: биспецифическое антитело, концентрация оригинального образца 5,04 мг/мл
- Объем загрузки образца: 20 мкл
- Концентрация биспецифического антитела: 0,5 мг/мл – 5 мг/мл
Рис. 2. Стандартная кривая одного биспецифического антитела
Стандартная кривая химерного белка Fc
Условия проведения эксперимента:
- Колонка: аналитическая колонка Helios A, 2,1 мм (ВД) × 30 мм (В)
- Система: Agilent 1200 HPLC, с УФ-мониторингом: 280 нм
- Уравновешивающий буферный раствор (буфер А): 50 мМ фосфатный буферный раствор + 150 мМ раствор NaCl, с рН 7,0
- Элюирующий буферный раствор (буфер В): 100 мМ фосфатный раствор, с рН 2,5
- Скорость потока: 1 мл/мин
- Образец: химерный белок Fc, концентрация оригинального образца 11,6 мг/мл
- Объем загрузки образца: 20 мкл
- Концентрация химерного белка Fc: 1 мг/мл – 10 мг/мл
Рис. 3. Стандартная кривая химерного белка Fc
Стандартная кривая образца иммуноглобулина G (IgG) человека в различных условиях элюирования
Условия проведения эксперимента:
- Колонка: аналитическая колонка Helios A, 2,1 мм (ВД) × 30 мм (В)
- Система: Agilent 1200 HPLC, с УФ-мониторингом: 280 нм
- Уравновешивающий буферный раствор (буфер А): 50 мМ фосфатный буферный раствор + 150 мМ раствор NaCl, с рН 7,0
- Элюирующий буферный раствор (буфер В): один из приведенного ниже списка:
- 100 мМ раствор лимонной кислоты, рН 2,5
- 100 мМ раствор ацетата, рН 2,5
- 100 мМ раствор фосфата, рН 2,5
- 100 мМ раствор глицина, рН 2,5
- 12 мМ раствор HCl, рН 1,9
- Скорость потока: 3 мл/мин
- Образец: IgG человека
- Объем загрузки образца: 20 мкл стандартного образца IgG
- Концентрация: 0,125 мг/мл – 20 мг/мл
Рис. 4. Стандартная кривая образца иммуноглобулина G (IgG) человека в различных условиях элюирования
Информация для заказа
Наименование изделия | Размер упаковки | Объем | Номер по каталогу | |
---|---|---|---|---|
Аналитическая колонка Helios A | 2,1 мм (ВД) × 30 мм (В) | 0,1 мл | LTHA-00001 | Заказать |