- БИОТИН
- КАЛЬМОДУЛИН
- КОНКАНАВАЛИН А
- СВЯЗЫВАНИЕ ГЕПАРИНА
- ДЖАКАЛИН
- МАЛЕИМИД
- НЕЙТРАВИДИН®
- ПОЛИ-L-ЛИЗИН
- ПОЛИ-L-АРГИНИН
- БЕЛОК A
- БЕЛОК G
- БЕЛОК A/G
- ВТОРИЧНЫЕ АНТИТЕЛА: КОЗЬИ АНТИТЕЛА К Fcy IgG МЫШИ
- ВТОРИЧНЫЕ АНТИТЕЛА: КОЗЬИ АНТИТЕЛА К Fc IgG КРОЛИКА
- СТРЕПТАВИДИН
- СТРЕПТАВИДИН С ВЫСОКОЙ СВЯЗЫВАЮЩЕЙ СПОСОБНОСТЬЮ
- ПРОРОСТКИ ПШЕНИЦЫ
- АМИНИРОВАННАЯ ПОВЕРХНОСТЬ
- КАРБОКСИЛИРОВАННЫЕ
Биотин
Биотин, или витамин Н (молекулярная масса 244 Да), является небольшим природным кофактором, присутствующим в каждой живой клетке в очень незначительных количествах (обычно менее 0,0001 %). Молекула биотина обычно связана с белками (такими как пируваткарбоксилаза) через свою карбоксильную группу валериановой кислоты посредством амидной связи с аминами боковой цепи лизина. Покрытые биотином поверхности являются мощным инструментом для реализации одного из наиболее полезных взаимодействий в иммунохимии, включающего специфическое связывание биотина с авидином, стрептавидином или нейтравидином.
Это связывание демонстрирует высокую постоянную аффинность (10-15 M).
Оптические характеристики полистирола не изменяются, что позволяет использовать модифицированную поверхность в качестве действительного инструмента для проведения биологических испытаний.
Продемонстрирована полезность этой поверхности для следующих применений:
- взаимодействие с авидином
- взаимодействия со стрептавидином
- взаимодействие с нейтравидином
Спецификация продукта:
Объем покрытия | Срок годности (месяцы) |
200 мкл/лунка | 36 |
КАЛЬМОДУЛИН
Компания Biomat (Биомат) разработала полистирольную поверхность с физически абсорбированным белком кальмодулин. Ca++-связывающий белок кальмодулин способен связывать белки преимущественно гидрофобными участками своей поверхности.
Оптические характеристики полистирола не изменяются, что позволяет использовать модифицированную поверхность в качестве действительного инструмента для проведения биологических испытаний.
Продемонстрирована полезность этой поверхности для следующих применений:
- взаимодействия с белками, участвующими в метаболизме гликогена
- взаимодействия с факторами, участвующими в механизме нейротрансмиссии
- взаимодействие с ферментами, участвующими в системе фосфорилирования НАД * / НАДФ *
Спецификация продукта
Объем покрытия | Срок годности (месяцы) |
200 мкл/лунка | 18 |
КОНКАНАВАЛИН А
Конканавалин А, принадлежащий к семейству лектинов, является гемагглютинином обыкновенной фасоли Canavalia ensiformis. Хорошо известно, что лектины широко используются для выделения гликоконъюгатов и гликопротеинов со специфическими углеводными структурами.
Конканавалин А демонстрирует специфическую аффинность к молекулам, содержащим α-D-маннопиранозил, α-D-глюкопиранозил и стерически связанным молекулам.
Поверхности, покрытые конканавалином А, представляют собой мощный и чувствительный инструмент для специфического связывания углеводной фракции гликопротеинов, ферментов и клеточных мембран.
Оптические свойства полистирола остаются неизменными, что позволяет использовать модифицированную поверхность в качестве мощного инструмента для диагностических анализов.
Пример применений:
- взаимодействие с гликопротеинами, гликопептидами и конъюгатами фермент-антитело
- полисахариды и гликолипиды
- взаимодействие с клеточными мембранами, гормонами и гормональными рецепторами
Спецификация продукта
Объем покрытия | Срок годности (месяцы) |
200 мкл/лунка | 24 |
СВЯЗЫВАНИЕ ГЕПАРИНА
Общие сведения
Гепарин является одним из наиболее интенсивно изучаемых гликозаминогликанов вследствие его антикоагулянтных свойств. Гепарин используют в качестве антикоагулянта либо в нативной нефракционированной форме (НФГ) с молекулярной массой ~16 кДа, либо в частично деполимеризованной форме, называемой низкомолекулярным (НМ) гепарином с молекулярной массой ~4–8 кДа.
Количественное определение гепарина
Компания Biomat (Биомат) разработала три планшета для связывания гепарина в качестве специальных поверхностей, на которых можно иммобилизовывать гепарин в различных диапазонах Ед/мл.
В предлагаемых анализах используют различные планшеты компании Biomat (Биомат) для связывания гепарина для количественных анализов с использованием ферментов для измерения in vitro содержания нефракционированного гепарина в жидкости с низким содержанием белка, такой как буферный раствор. Эти ИФА-испытания на гепарин представляют собой сравнительные анализы, в которых интенсивность колориметрического сигнала обратно пропорциональна количеству гепарина, присутствующего в испытуемом образце.
Принцип анализа
Анализируемые испытуемые образцы сначала смешивают с известным количеством биотинилированного гепарина в лунках планшета для связывания гепарина компании Biomat (Биомат).
Гепарин в испытуемом образце конкурирует с биотинилированным гепарином за участки связывания планшета для связывания гепарина. После удаления несвязанного реактива и испытуемого образца, добавляют конъюгат стрептавидин-пероксидаза для выявления реакции.
Концентрацию в испытуемом образце определяют с использованием стандартной кривой для известных количеств гепарина.
Спецификация продукта
Код | Диапазон | Объем покрытия | Срок годности (месяцы) |
HC1 | 0,01–2,0 Ед/мл | 100 мкл/лунка | 24 |
HC2 | 0,5–40,0 Ед/мл | 100 мкл/лунка | 24 |
HC3 | 2,0–160,0 Ед/мл | 200 мкл/лунка | 24 |
ДЖАКАЛИН
Микропланшеты на 96 лунок для анализа джакалина компании Biomat (Биомат) покрыты поверхностно-активным веществом для блокирования участков неспецифического связывания и сохранения стабильной активности.
Джакалин, принадлежащий к семейству лектинов, является тетрамерным (молекулярная масса 40 кДа) углеводсвязывающим белком, агглютинином, выделенным из семян джекфрута Artrocarpus integrifolia. Хорошо известно, что лектины широко используются для выделения гликоль-конъюгатов и гликопротеинов со специфическими углеводными структурами.
Джакалин демонстрирует специфическую аффинность к молекулам, содержащим невосстанавливающие α-D-галактозильные группы, обычно присутствующие в биохимической структуре IgA1 и клеточных мембранах.
Пример применений:
- Специфическое связывание IgA1 человека, стерически ориентированное
- Очистка иммуноглобулинов человека (особенно IgA1)
- Отделение иммунокомплексов антиген-антитело
- Отделение IgA1 от загрязнителей
- Стимуляция T-клеток
Спецификация продукта
Объем покрытия | Связывающая способность | Чувствительность | Срок годности (месяцы) |
100 мкл/лунка | ~4 пмоль IgA/лунка | 0,0161 мкг/мл (1,61 нг/лунка) IgA | 24 |
МАЛЕИМИД
Продукт компании Biomat (Биомат) является микропланшетом на 96 лунок, покрытым малеимидом и обработанным для блокирования участков неспецифического связывания и сохранения стабильной активности.
Покрытые малеимидом поверхности позволяют предложить мощный инструмент для связывания биомолекул, содержащих свободные сульфгидрильные группы (например, пептидов, содержащих терминальный цистеин, или тиол-содержащих гаптенов), или восстанавливаемые дисульфидные связи, которые сложны для нанесения на планшеты из полистирола. Данные планшеты с покрытием являются очень полезным инструментом для анализов, требующих сайт-направленной ориентации определенных биомолекул, особенно при производстве антител.
При pH 6,5–7,5 малеимид реагирует со свободными сульфгидрильными группами с образованием стабильных связей, тогда как реакция с амином становится значимой при pH > 7,5.
Если сульфгидрил-содержащие пептиды и белки окисляются в растворе и образуют дисульфидные связи, они должны быть предварительно восстановлены до свободных сульфгидрилов для обеспечения взаимодействия с малеимидом.
Спецификация продукта
Объем покрытия | Связывающая способность | Срок годности (месяцы) |
100 мкл/лунка | ~440 пмоль BioGEE/лунка | 3 |
НЕЙТРАВИДИН®
Поверхности, покрытые нейтравидином позволяют предложить мощный и универсальный инструмент связывания биотинилированных молекул, минимизирующий неспецифические взаимодействия.
Нейтравидин является дегликозилированным авидином (ММ 60 кДа), содержащим четыре идентичные биотин-связывающие субъединицы с очень высокой аффинностью к биотину (Ka = 10-15 M).
Его изоэлектрическая точка близка к нейтральной (pI = 6,3), и у него наименьшая способность к неспецифическому связыванию среди известных биотин-связывающих белков.
По сравнению со стрептавидином в первичной структуре нейтравидина отсутствует последовательность RYD (Arg-Tyr-Asp): отсутствие такой последовательности полностью исключает возможность взаимодействия с последовательностью RGD (Arg-Gly-Asp), присутствующей в мембранных рецепторах многих клеток.
Это делает его очень полезным в сферах применения, когда важно избегать неспецифического взаимодействия с клеточными поверхностями.
Поверхность, покрытая нейтравидином, обладает связывающей способностью аналогичной способности поверхности, покрытой стрептавидином, в отношении биотина и биотинилированных молекул.
Спецификация продукта
Объем покрытия | Способность к связыванию малых молекул | Способность к связыванию больших молекул | Срок годности (месяцы) |
100 мкл/лунка | ~5–6 пмоль d-биотина/лунка | 100 нг IgG/лунка | 24 |
ПОЛИ-L-ЛИЗИН
Компания Biomat (Биомат) разработала полистирольную поверхность с физически абсорбированным поли-L-лизином. Цепь мономерного L-лизина демонстрирует высокую плотность групп:
- α-амино
- α-карбоксил
- ε-амино
Эти группы способны реагировать путем образования электростатических и стереоспецифических связей. Оптические характеристики полистирола не изменяются, что позволяет использовать модифицированную поверхность в качестве действительного инструмента для проведения биологических испытаний.
Продемонстрирована полезность этой поверхности для следующих применений:
- взаимодействия с плазминогеном и активатором плазминогена
- взаимодействия с рибосомальной РНК
- взаимодействие с двухцепочечной ДНК
Спецификация продукта
Объем покрытия | Срок годности (месяцы) |
200 мкл/лунка | 24 |
ПОЛИ-L-АРГИНИН
Компания Biomat (Биомат) разработала полистирольную поверхность с физически абсорбированным поли-L-аргинином. Цепь мономерного L-аргинина демонстрирует высокую плотность групп:
- α-амино
- α-карбоксил
- гуанидино
эти группы способны реагировать путем образования электростатических и стереоспецифических связей.
Оптические характеристики полистирола не изменяются, что позволяет использовать модифицированную поверхность в качестве действительного инструмента для проведения биологических испытаний.
Продемонстрирована полезность этой поверхности для следующих применений:
- взаимодействия с серинопротеазами
- взаимодействия с факторами, способствующими созреванию
Спецификация продукта
Объем покрытия | Срок годности (месяцы) |
200 мкл/лунка | 12 |
БЕЛОК A
Продукт компании Biomat (Биомат) является микропланшетом на 96 лунок, покрытым рекомбинантным белком A и белком для блокирования участков неспецифического связывания и сохранения стабильной активности.
Белок A специфически связывается с Fc-областью иммуноглобулинов многих видов млекопитающих с ориентацией, обеспечивающей свободную доступность F(ab)2-связывающих участков для эффективного связывания с эпитопом. Нанесенный в виде покрытия на микропланшеты белок A может надежно захватывать IgG при нанесении непосредственно или в виде комплексов антиген/антитело.
Пример применений:
- специфическое и стерически ориентированное связывание IgG
- отделение IgG от других иммуноглобулинов
- отделение комплексов антиген-антитело
- отделение IgG от загрязнителей
- выделение и анализ белков слияния
- обнаружение и идентификация антител к эритроцитам (только на планшетах с U-образным дном)
Спецификация продукта
Объем покрытия | Связывающая способность | Чувствительность | Срок годности (месяцы) |
200 мкл/лунка |
2,66–3,33 пмоль IgG/лунка (объем 100 мкл) |
0,113 нг IgG человека/лунка | 24 |
БЕЛОК G
Продукт компании Biomat (Биомат) является микропланшетом на 96 лунок, покрытым рекомбинантным белком G и белком для блокирования участков неспецифического связывания и сохранения стабильной активности.
Белок G специфически связывается с Fc-областью иммуноглобулинов многих видов млекопитающих с ориентацией, обеспечивающей свободную доступность F(ab)2-связывающих участков для эффективного связывания с эпитопом. Нанесенный в виде покрытия на микропланшеты белок G может надежно захватывать IgG при нанесении непосредственно или в виде комплексов антиген/антитело.
Пример применений:
- специфическое и стерически ориентированное связывание IgG
- отделение IgG от других иммуноглобулинов
- отделение комплексов антиген-антитело
- выделение и анализ белков слияния
Спецификация продукта
Объем покрытия | Связывающая способность | Чувствительность | Срок годности (месяцы) |
200 мкл/лунка |
2,66–3,33 пмоль IgG/лунка (объем 100 мкл) |
0,056 нг IgG человека/лунка | 24 |
БЕЛОК A/G
Продукт компании Biomat (Биомат) является микропланшетом на 96 лунок, покрытым рекомбинантным белком A/G и белком для блокирования участков неспецифического связывания и сохранения стабильной активности.
Белок A/G включает четыре Fc-связывающих домена белка A и два домена белка G, что делает его универсальным инструментом. Зависимость связывания белка A/G от pH меньше, чем у белка A, но характеризуется аддитивными для белков A и G показателями.
Белок A/G связывается с IgG, IgA, IgM человека; он связывается со всеми подклассами IgG мыши, и не связывается с IgA, IgM мыши и сывороточным альбумином. При нанесении в виде покрытия на микропланшеты белок A/G может использоваться для обеспечения надежных очистки и выявлении моноклональных антител IgG мыши без помех от IgA, IgM и сывороточного альбумина.
Пример применений:
- специфическое и стерически ориентированное связывание антител
- максимальная специфичность и емкость
- сохранение активности и ориентация антитела для обеспечения максимального связывания
- непригодность, как правило, для сэндвич-варианта анализов ИФА
Спецификация продукта
Объем покрытия | Связывающая способность | Срок годности (месяцы) |
200 мкл/лунка |
2,66–3,33 пмоль IgG/лунка (объем 100 мкл) |
24 |
ВТОРИЧНЫЕ АНТИТЕЛА: КОЗЬИ АНТИТЕЛА К Fcy IgG МЫШИ (Подклассы 1+2a+2b+3)
Продукт компании Biomat (Биомат) является микропланшетом на 96 лунок, покрытым козьими антителами к Fcγ IgG мыши (подклассы 1+2a+2b+3) и белком для блокирования участков неспецифического связывания и сохранения стабильной активности.
Аффинно очищенные козьи антитела к IgG мыши специфически связываются с Fc-областью иммуноглобулинов мыши подклассов 1, 2a, 2b и 3 с минимальной перекрестной реакцией на белки сыворотки человека, коровы и кролика.
Эти планшеты могут использоваться в качестве твердой подложки для большинства сэндвич-ИФА с захватом IgG мыши и антителом для обнаружения немышиного IgG. Другие области применения включают конкурентный ИФА, изотипирование IgG и скрининг/селекцию гибридом. Эти планшеты идеально подходят для анализа связывания, когда количество доступных антител мало, или когда они денатурируются и становятся неактивными при прямой адсорбции на полистирольных планшетах.
Особенности планшетов, покрытых козьими антителами к IgG мыши:
- предотвращают денатурацию антител при прямой адсорбции на полистироле
- в отличие от планшетов с белком A или G эти планшеты могут связывать IgG только целевых видов.
- эти планшеты демонстрируют более высокую способность связывания антител в сравнении с прямой адсорбцией на полистироле при использовании разбавленных растворов IgG мыши
Спецификация продукта
Объем покрытия | Связывающая способность | Чувствительность | Срок годности (месяцы) |
100 мкл/лунка | ~0,625 пмоль/лунка | ~0,01 мкг/мл | 18 |
ВТОРИЧНЫЕ АНТИТЕЛА: КОЗЬИ АНТИТЕЛА К Fc IgG КРОЛИКА
Продукт компании Biomat (Биомат) является микропланшетом на 96 лунок, покрытым козьими антителами к IgG кролика и белком для блокирования участков неспецифического связывания и сохранения стабильной активности.
Аффинно очищенные козьи антитела к IgG кролика специфически связываются с Fc-областью иммуноглобулинов кролика с минимальной перекрестной реакцией на белки сыворотки человека.
Эти планшеты идеально подходят для анализа связывания, когда количество доступных антител мало, или когда они денатурируются и становятся неактивными при прямой адсорбции на полистирольных планшетах.
Особенности планшетов, покрытых козьими антителами к IgG кролика:
- предотвращают денатурацию антител при прямой адсорбции на полистироле
- в отличие от планшетов с белком A или G эти планшеты могут связывать IgG только целевых видов.
- эти планшеты демонстрируют более высокую способность связывания антител в сравнении с прямой адсорбцией на полистироле при использовании разбавленных растворов IgG кролика
Спецификация продукта
Объем покрытия | Связывающая способность | Чувствительность | Срок годности (месяцы) |
100 мкл/лунка | ~0,625 пмоль/лунка | ~0,01 мкг/мл | 18 |
СТРЕПТАВИДИН
Поверхности, покрытые стрептавидином, позволяют предложить мощный и универсальный инструмент связывания любых биотинилированных молекул (белки, пептиды, полисахариды, олигонуклеотиды, фрагменты ДНК и т. д.)
Стрептавидин – тетрамерный белок (ММ 60 кДа) с очень высокой аффинностью к биотину (Ka = 10-15 М); связывание является наиболее сильным известным нековалентным биологическим взаимодействием.
Биотин – небольшая молекула, которая может соединяться со многими белками без потери или изменения их активности, каждый белок может связывать много молекул биотина.
Поскольку каждая субъединица стрептавидина связывает одну молекулу биотина, получаемый эффект заключается в значительном повышении чувствительности анализа.
Основные особенности образования связи стрептавидин-биотин
- стабильность
- специфичность
- аффинность
делают ее полезной для специальных применений молекул, не обеспечивающих надежного сцепления за счет пассивной адсорбции или приводящих к адсорбции в неблагоприятной ориентации.
Спецификация продукта
Объем покрытия | Способность к связыванию малых молекул | Способность к связыванию больших молекул | Срок годности (месяцы) |
200 мкл/лунка | ~12–14 пмоль/лунка (200 мкл) | 100 нг IgG/лунка (100 мкл) | 36 |
СТРЕПТАВИДИН С ВЫСОКОЙ СВЯЗЫВАЮЩЕЙ СПОСОБНОСТЬЮ
Планшеты, покрытые стрептавидином с высокой связывающей способностью, являются мощным и универсальным инструментом для связывания любых биотинилированных молекул (белки, пептиды, полисахариды, олигонуклеотиды, фрагменты ДНК и т. д.).
Биотин – небольшая молекула, которая может соединяться со многими белками без потери или изменения их активности, каждый белок может связывать много молекул биотина.
Поскольку каждая субъединица стрептавидина связывает одну молекулу биотина, получаемый эффект заключается в значительном повышении чувствительности анализа.
В отличие от обычных планшетов, покрытых стрептавидином, эти планшеты особенно полезны в сравнительных испытаниях для определения содержания биотинилированных молекул с низкой молекулярной массой.
Спецификация продукта
Объем покрытия | Способность к связыванию малых молекул | Способность к связыванию больших молекул | Срок годности (месяцы) |
100 мкл/лунка | ~35 пмоль/лунка (объем 100 мкл) | 100 нг IgG/лунка (100 мкл) | 36 |
ПРОРОСТКИ ПШЕНИЦЫ
Лектин проростков пшеницы, принадлежащий к семейству лектинов, является гемагглютинином, полученным из зародышей пшеницы Triticum Vulgaris. Хорошо известно, что лектины широко используются для выделения гликоконъюгатов и гликопротеинов со специфическими углеводными структурами.
Лектин проростков пшеницы проявляет специфическую аффинность к молекулам, содержащим остаток N-ацетил-D-глюкозамина.
Поверхности, покрытые лектином проростков пшеницы, являются мощным и чувствительным инструментом для специфического связывания углеводной фракции гликопротеинов, ферментов и клеточных мембран.
Оптические свойства полистирола остаются неизменными, что позволяет использовать модифицированную поверхность в качестве мощного инструмента для диагностических анализов.
Пример применений:
- исследований поверхностей нормальных и трансформированных клеток
- очистка гликопротеина, включая мембранные гликопротеины
- исследования изменений поверхностей клеток в ходе визуализации и клеточного цикла
Спецификация продукта
Объем покрытия | Срок годности (месяцы) |
200 мкл/лунка | 24 |
АМИНИРОВАННАЯ ПОВЕРХНОСТЬ
Поверхности с ковалентно связанными первичными аминогруппами предназначены для активизации ковалентной иммобилизации соединений, содержащих реакционноспособные фрагменты, такие как амино-, карбоксильные или тиольные группы, при помощи хорошо известных гомогетеробифункциональных сшивающих агентов, например N-гидроксисукцинимида (NHS) или сукцинимидил-4-(N-малеидометил)циклогексан-1-карбоксилата (SMCC).
Данный тип иммобилизации позволяет преодолеть некоторые ограничения, связанные с физической адсорбцией молекул на поверхностях:
- иммобилизация молекул, которые могут быть только слабо связаны или совсем не могут быть связаны путем физической адсорбции, а именно небольших пептидов (ММ 1 000–5 000 Да), лекарственных средств, токсинов или гормонов
- ориентационная иммобилизация молекул для обеспечения целостности и доступности их специфических участков с исключением риска ингибирования этих участков путем случайной физической адсорбции таких молекул, как Fab-SH-фрагменты антител, стрептавидин, полисахариды или нуклеиновые кислоты (одно- или двухцепочечные)
- более высокая стабильность хранения в сравнении со стабильностью при физической адсорбции в связи с уменьшенным риском спонтанной десорбции
Спецификация продукта
Активная поверхность | Срок годности (месяцы) |
200 мкл/лунка | 24 |
КАРБОКСИЛИРОВАННЫЕ
Поверхности с ковалентно связанными карбоксильными группами предназначены для содействия ковалентной иммобилизации соединений, содержащих реакционноспособные свободные аминогруппы, с использованием ЭДК-опосредованного аминирования.
Данный тип иммобилизации может преодолеть некоторые ограничения, связанные с физической адсорбцией молекул на поверхностях:
- иммобилизация молекул, которые связаны слабо или не связаны совсем физической адсорбцией, а именно небольших пептидов (молекулярная масса 1 000–5 000 Да), лекарственных средств, токсинов или гормонов
- ориентированная иммобилизация молекул для сохранения целостности и доступности их специфических участков
- повышенная стабильность хранения в сравнении со стабильностью физической адсорбции в связи с пониженным риском спонтанной десорбции
Спецификация продукта
Действующее вещество | Срок годности (месяцы) |
200 мкл/лунка | 24 |
Подробные указания и методики работы с модифицированными поверхностями планшетов Biomat